Revisão de Histologia do professor Jessica sobre os conceitos básicos, corantes e microscopia básica.
1. O que é o poder de resolução?
O poder de resolução é a capacidade de um sistema óptico, como um microscópio, de distinguir dois pontos muito próximos como entidades separadas. É um indicador da precisão com que detalhes finos podem ser visualizados. Quanto menor for a distância mínima entre dois pontos que o instrumento pode distinguir, maior será o seu poder de resolução.
2. Quem inventou o microscópio composto?
O microscópio composto foi inventado por Zacharias Janssen e seu pai Hans Janssen, em meados do século XVI, na Holanda. Eles foram os primeiros a combinar duas lentes em um tubo, criando um instrumento capaz de ampliar objetos mais do que era possível com uma única lente.
3. Quem propôs a teoria celular?
A teoria celular foi proposta por dois cientistas alemães, Matthias Schleiden e Theodor Schwann, em 1839. Eles estabeleceram que todos os organismos vivos são compostos por células e que a célula é a unidade fundamental da vida.
4. Quais são os três postulados da teoria celular?
Todos os seres vivos são compostos por uma ou mais células.
A célula é a unidade básica da estrutura e função dos organismos.
Todas as células provêm de células preexistentes através da divisão celular.
5. Descreva brevemente os componentes do microscópio óptico comum.
O microscópio óptico comum é composto por várias partes principais:
Ocular: Lente através da qual o observador olha.
Objetivos: Lentes com diferentes ampliações que aproximam a imagem.
Platina: Superfície onde a lâmina com a amostra é colocada.
Fonte de luz: Ilumina a amostra de baixo.
Condensador: Focaliza a luz na amostra.
Diafragma: Controla a quantidade de luz que passa pela amostra.
Parafusos de ajuste: Permitem o foco da imagem (macrométrico e micrométrico).
6. Quais são as partes de um microscópio?
Ocular
Objetivos
Revólver
Platina
Pinças
Condensador
Diafragma
Fonte de luz
Parafusos de ajuste macrométrico e micrométrico
Base
Braço
7. Descreva brevemente o sistema de iluminação.
O sistema de iluminação de um microscópio óptico é composto por uma fonte de luz, geralmente uma lâmpada halógena ou LED, que ilumina a amostra a partir de baixo. A luz passa através do condensador, que a focaliza na amostra, e o diafragma controla a quantidade de luz que atinge a lâmina. Este sistema é essencial para garantir que a amostra seja adequadamente iluminada, permitindo uma visualização clara e detalhada.
8. Liste 10 tipos de microscópios.
Microscópio óptico composto
Microscópio estereoscópico (ou de dissecação)
Microscópio eletrônico de transmissão (TEM)
Microscópio eletrônico de varredura (SEM)
Microscópio de campo escuro
Microscópio de contraste de fase
Microscópio de fluorescência
Microscópio confocal
Microscópio de força atômica (AFM)
Microscópio de varredura por sonda (SPM)
9. Mencione o procedimento de iluminação Köhler.
O procedimento de iluminação Köhler é uma técnica que proporciona iluminação uniforme e bem distribuída em uma amostra, aumentando o contraste e a qualidade da imagem. O processo envolve ajustar o condensador e a altura da lâmpada de forma que o campo de luz seja homogeneamente iluminado, sem sombras ou brilhos excessivos. Isso é feito ajustando o diafragma do campo e o condensador para conseguir uma iluminação óptima.
10. Mencione brevemente o procedimento para a limpeza do microscópio.
O procedimento para a limpeza do microscópio inclui:
Desligar o microscópio e desconectá-lo da fonte de energia.
Usar um pincel ou ar comprimido para remover a poeira das lentes e da platina.
Limpar as lentes oculares e objetivas com papel específico para lentes e solução de limpeza adequada, usando movimentos circulares.
Limpar a platina com um pano macio e levemente umedecido.
Guardar o microscópio coberto, em um local seco e livre de poeira.
11. O que é a técnica histológica?
A técnica histológica refere-se ao conjunto de procedimentos utilizados para preparar amostras de tecido para estudo microscópico. Isso inclui fixação, desidratação, inclusão, corte, montagem e coloração, com o objetivo de preservar e visualizar a estrutura celular e tecidual.
12. O que é a fixação?
A fixação é o primeiro passo na preparação de amostras histológicas, onde o tecido é tratado com um fixador químico, como formaldeído, para preservar sua estrutura celular. A fixação impede a degradação enzimática e mantém a integridade morfológica das células e dos tecidos.
13. O que é a abertura numérica (AN)?
A abertura numérica (AN) é uma medida da capacidade de uma lente de coletar luz e resolver detalhes finos em uma amostra. Ela é determinada pela fórmula AN = n * sen(θ), onde "n" é o índice de refração do meio entre a lente e a amostra, e "θ" é o ângulo de abertura da lente. Quanto maior a AN, maior a resolução do microscópio.
14. Quais são as qualidades que os fixadores devem ter?
Rápida penetração: Para preservar rapidamente as estruturas celulares.
Prevenir a autólise: Impedir a degradação enzimática do tecido.
Manter a integridade estrutural: Preservar a morfologia e a ultraestrutura das células.
Ser compatível com colorações subsequentes: Permitir a utilização de diferentes técnicas de coloração.
Baixa toxicidade: Ser seguro para manuseio.
15. Quais são os fixadores mais utilizados?
Formaldeído (formalina)
Glutaraldeído
Álcool etílico
Tetróxido de ósmio
Bouin's solution
16. Quais são os cinco tipos de micrótomos?
Micrótomo rotativo
Micrótomo de deslizamento
Micrótomo de congelamento
Micrótomo ultrafino
Micrótomo vibratório
17. Quais são os métodos de coloração?
Coloração por Hematoxilina e Eosina (H&E)
Coloração de Gram
Coloração de Giemsa
Coloração PAS (Ácido Periódico-Schiff)
18. Liste os passos da técnica de Hematoxilina e Eosina (HE).
Os passos da técnica de Hematoxilina e Eosina são:
Desparafinização: Remover a parafina das seções de tecido.
Reidratação: Passar a amostra por séries de álcoois em concentração decrescente até a água.
Coloração com Hematoxilina: Imersão da amostra em hematoxilina para colorir os núcleos.
Lavagem: Lavar para remover o excesso de corante.
Diferenciação: Usar uma solução ácida para remover a hematoxilina não ligada.
Coloração com Eosina: Imersão da amostra em eosina para colorir o citoplasma.
Desidratação: Passar a amostra por álcoois em concentração crescente.
Montagem: Montar a amostra em uma lâmina de vidro com um meio de montagem.
19. O que é metacromasia?
Metacromasia é um fenômeno onde certas estruturas celulares, quando coradas com corantes básicos como o azul de toluidina, exibem uma mudança de cor diferente da cor original do corante. Isso ocorre devido à interação entre o corante e componentes celulares como os glicosaminoglicanos, resultando em uma cor diferente, geralmente azul ou roxo.
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