Neste modulo vamos abortar os principais tipos de coloração de tecidos na disciplina de HISTOLOGIA e principalmente como diferenciar cada estrutura baseado no seu tipo de coloração especifica.
TIPOS DE COLORAÇÃO
CORANTE | METODO | PRINCIPAL FUNÇÃO | COR PARA ESTRUTURA | IMAGEM |
- Iosina | - Corante ácido que se liga a proteínas básicas. | - Destaca fibras colágenas e tecido conjuntivo. | - Colore colágeno e outras proteínas extracelulares em vermelho. |  |
- Hematoxilina | - Corante básico que liga-se a ácidos nucleicos. | - Realça núcleos celulares e algumas estruturas citoplasmáticas. | - Colore núcleos em azul ou roxo. |  |
- Eosina e Hematoxilina | - Método de coloração duplo, também conhecido como HE. | - Permite a visualização geral dos tecidos. | - Hematoxilina colore núcleos em azul; eosina colore citoplasma e estruturas extracelulares em rosa. |  |
- Tricômio de Masson | - Técnica de coloração que utiliza múltiplos corantes. | - Diferencia entre colágeno e outros componentes do tecido. | - Colore colágeno em azul ou verde, músculo em vermelho, e citoplasma em rosa. |  |
- PAS (Ácido Periódico de Schiff) | - Oxida carboidratos para revelar mucopolissacarídeos. | - Identificação de carboidratos e mucopolissacarídeos. | - Colore carboidratos e mucinas em rosa intenso. |  |
- Sudan Red | - Corante lipossolúvel que se liga a lipídios. | - Visualização de lipídios e gorduras. | - Colore lipídios em vermelho. |  |
- Imunohistoquímica | - Técnica que utiliza anticorpos específicos para marcar antígenos. | - Identificação de proteínas e antígenos específicos em tecidos. | - A cor depende do anticorpo secundário usado; pode variar de marrom a verde, azul, etc. |  |
Técnica para coloração de HE (Esina e Hematoxilina)
Passo | Objetivo | Procedimento |
1. Fixação do Tecido | Preservar a estrutura e composição química do tecido. | Mergulhar o tecido em formaldeído a 10% por algumas horas a dias. |
2. Desidratação | Remover a água do tecido para prepará-lo para a inclusão em parafina. | Passar o tecido por banhos crescentes de álcool (70%, 80%, 95%, 100%). |
3. Clareamento (Diafanização) | Tornar o tecido translúcido para a infiltração da parafina. | Submergir o tecido em xilol ou outro solvente apropriado. |
4. Inclusão em Parafina | Dar suporte ao tecido para que ele possa ser cortado em fatias finas. | Infiltrar o tecido com parafina líquida e deixá-lo solidificar em moldes. |
5. Corte | Obter fatias finas do tecido para observação ao microscópio. | Usar um micrótomo para cortar seções de 4-5 micrômetros de espessura. |
6. Montagem das Lâminas | Preparar as seções para coloração. | Montar as seções de tecido em lâminas de vidro. |
7. Desparafinização | Remover a parafina antes da coloração. | Passar as lâminas por banhos de xilol seguidos por séries de álcool decrescentes (100%, 95%, 70%). |
8. Coloração com Hematoxilina | Corar os núcleos celulares de azul a roxo. | Mergulhar as lâminas em hematoxilina, lavar em água corrente. |
9. “Blueing” | Converter o corante em uma forma que adere melhor ao núcleo. | Passar as lâminas por uma solução alcalina (amônia diluída ou água corrente). |
10. Coloração com Eosina | Corar o citoplasma e outros componentes extracelulares de rosa. | Mergulhar as lâminas em eosina, lavar brevemente. |
11. Desidratação Final | Preparar a lâmina para montagem permanente. | Passar as lâminas novamente por séries de álcoois crescentes, seguidos de xilol. |
12. Montagem Final | Preservar a lâmina para observação prolongada. | Cobrir a seção com lamínula usando um meio de montagem adequado. |
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